山東濰坊優(yōu)質(zhì)微生物發(fā)酵的培養(yǎng)和群體
來源: 發(fā)布時(shí)間:2013-12-17 返回列表
生物發(fā)酵有什么應(yīng)用呢?小編簡(jiǎn)單的給大家介紹一下:
一、微生物發(fā)酵的類群
1675年,荷蘭學(xué)者列文虎克用自己制造的顯微鏡,觀察了雨水、井水、河水等,發(fā)現(xiàn)其中許多微小的生物在活動(dòng),并將這些形體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,通常要用光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡才能看清的生物,統(tǒng)稱為微生物(microorganism簡(jiǎn)稱microbe)。
微生物所包含的類群十分龐雜,在目前已經(jīng)知道的大約10萬種微生物中,既包括沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒等,又包括原核生物界、真菌界以及原生生物界的生物。
二、微生物發(fā)酵的培養(yǎng)
1、培養(yǎng)基配制
人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)DD培養(yǎng)基。其中,配制成的液體狀態(tài)的基稱為液體培養(yǎng)基,配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入最常用的凝固劑瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基,它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng),可以形成肉眼可見的菌落。
制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制作步驟:計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。順序不能顛倒,并且在制作過程中特別是倒平板時(shí)徹底做到“無菌”。
2、消毒與滅菌
微生物培養(yǎng)過程中的無菌操作包括消毒和滅菌兩大類,分別又有各種不同的方法。對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒;將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。
日常生活中經(jīng)常用到煮沸消毒法,即在100℃煮沸5~6min可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。對(duì)于一些不耐高溫的液體(如牛奶),則使用巴氏消毒法。此外,人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。
將微生物的接種工具,如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具,直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以迅速徹底地滅菌(灼燒滅菌)。將滅菌物品放入干熱滅菌箱內(nèi),在160~170℃加熱1~2h可達(dá)到滅菌的目的(干熱滅菌)。將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),在壓力為100kPa,溫度為121℃的條件下,維持15~30min,可達(dá)到良好的滅菌效果(高壓蒸汽滅菌)。
3.純化培養(yǎng)
微生物接種的方法很多,最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后,可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。
稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋的菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。
將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37℃恒溫箱中,培養(yǎng)12h和24h后,分別觀察并記錄結(jié)果。
綜上所述:微生物發(fā)酵分為培養(yǎng)基配制和消毒與滅菌等。酵素菌.中國(guó)官方網(wǎng)站島本微生物技術(shù)研究所微生物發(fā)酵!